تعرف علي …. ما هي تقنية ثلاثية الألوان 2025

تقنية الصبغة ثلاثية الألوان: وهي تقنية مخبرية يتم فيها استخدام ثلاثة ألوان أساسية لعملية التلوين وهي الأحمر أو الأصفر أو البرتقالي أو الأخضر أو ​​الأزرق، ومن هنا جاء اسم الألوان الثلاثة. يتم استخدامه لتلطيخ العينات النسيجية.

مكونات تقنية التلوين ثلاثي الألوان

تتكون تقنية الألوان الثلاثة من ثلاثة أصباغ ملونة تستخدم في عملية التلوين:

• لون أحمر: يتم استخدام صبغة حمض الفوكسين، أو إكسيليدين بونسو، أو كروموتروب 2R، أو بيبريتش القرمزي، أو بونسو 6R أو الفلوكسين.

• اللون الأزرق أو الأخضر: الأخضر فاتح مصفر SF، أخضر سريع FCF، أزرق الميثيل أو أزرق مائي.

• اللون الأصفر أو البرتقالي: يتم استخدام حمض البكريك أو البرتقالي G أو Martius الأصفر أو التارترازين أو الأصفر المطحون.

ميزات تقنية الألوان الثلاثية

تتمتع تقنية الألوان الثلاثة بالعديد من المميزات التي تميزها عن غيرها، ومن هذه المميزات:

• وتعتبر طريقة مهمة وتسمى ثلاثي الألوان أو ثلاثي الألوان.

• يتم استخدام ثلاثة ألوان من الأصباغ، ويتم استخدام صبغتين أو أكثر من الصبغات الحمضية، بالإضافة إلى استخدام أحماض مختلفة.

• يتم استخدامها في عينات الأنسجة لزيادة تباين السمات المجهرية في الخلايا والأنسجة، مما يسهل رؤيتها تحت المجهر.

• تقوم هذه التقنية بتلوين الأنسجة العضلية باللون الأحمر وألياف الكولاجين باللون الأخضر أو ​​الأزرق.

أهمية تقنية ثلاثي الألوان

تكمن أهمية تقنية الألوان الثلاثة أو الألوان الثلاثة في:

• تميز هذه الطريقة العضلات عن الكولاجين، وخلايا ألفا النخامية عن خلايا بيتا، والفيبرين عن الكولاجين، والميتوكوندريا عن الخلايا.

• تساعد هذه الصبغة في تحديد التغيرات في الأنسجة مثل تليف الكبد وتمييز الأورام عن الخلايا العضلية والخلايا الليفية.

• تساعد هذه الصبغة على تقدير كمية الكولاجين التي تسبب البقع ألياف الكولاجين الدقيقة بين خلايا الكبد عند تلطيخ خزعات الكبد.

آلية تنفيذ تقنية التلوين ثلاثي الألوان

آلية تنفيذ تقنية التلوين ثلاثي الألوان بشكل عام هي كما يلي:

• تعتمد آلية تقنية ثلاثي الألوان على استخدام صبغتين حمضيتين أو أكثر.

• تقوم هذه الأصباغ الحمضية بتلوين البروتينات الأساسية عن طريق تطبيقها على التوالي على العينة، ويمكن التلاعب بنمط اللون أو اللون.

• لإزالة الصبغة، يتم استخدام الأحماض المتعددة، مثل حمض الفسفوموليبدك، أو مادة صلبة صفراء، أو حمض الفوسفوريك التنجستي، لأن هذه الأحماض لها وزن جزيئي مرتفع، مما يجعلها تزيل الصبغة من الكولاجين بسهولة.

• ثم يتم تطبيق صبغة حمراء في حمض الأسيتيك المخفف لتجاوز جميع المكونات، ثم يتم تطبيق متعدد الأحماض لإزالة الصبغة الحمراء من الكولاجين وبعض المكونات الأخرى.

• يتم بعد ذلك تطبيق صبغة حمضية ثانية، زرقاء أو خضراء، في حمض الأسيتيك المخفف، الذي يزيح متعدد الأحماض، مما يعطي الكولاجين لونًا مختلفًا عن الصبغة الأساسية المستخدمة.

• عند صبغ خلايا الدم الحمراء، يتم تطبيق صبغة صفراء أو برتقالية ذات وزن جزيئي منخفض قبل صبغ الصبغة الحمراء، ويتم تطبيقها عادةً من محلول مشبع بنسبة 80٪ من الإيثانول مع حمض البكريك وصبغة متعددة الأحماض.

• تسمى البقع التي يتم تطبيق الأصباغ عليها ثلاثية الألوان، ويسمى تسلسل متعدد الأحماض أو متعدد الأحماض تسلسل ثلاثي الألوان متعدد الخطوات.

• يمكن دمج جميع الأصباغ مع أو بدون الأحماض المتعددة في محلول واحد.

طرق التلوين الرئيسية باستخدام تقنية الألوان الثلاثة

هناك عدة طرق تستخدم للتلوين بتقنية الألوان الثلاثة وهي:

• طريقة ماسون ثلاثية الألوان: إنها طريقة تتضمن بروتوكولًا وخطوات طويلة لصبغ الخلايا والأنسجة الضامة وتمييزها. يتم تطبيق ثلاثي الكروم عن طريق غمر العينة الصلبة في هيماتوكسيلين الحديد ثم وضعها في ثلاثة محاليل مختلفة تسمى A وB وC. ويسمى المحلول A صبغة البلازما ويحتوي على أصباغ حمراء مختلفة، والمحلول B، ومتعدد الأحماض في الماء المقطر، والمحلول C ، وهو ما يسمى صبغ الألياف. يمكن استخدام الأصباغ الصفراء أو الزرقاء أو الخضراء. تعطي هذه الأصباغ الكيراتين لونًا أحمر، والألياف العضلية والكولاجين لونًا أزرقًا أو أخضرًا، والعظام والسيتوبلازم لونًا أحمر فاتحًا أو ورديًا، وتكون نوى الخلايا بنية داكنة وسوداء.

• طريقة فان جيسون: إنها واحدة من أقدم طرق الصبغ ذات الخطوة الواحدة وفقًا لطريقة ثلاثي الألوان، حيث يتم صبغ العضلات والسيتوبلازم باللون الأصفر والكولاجين باللون الأحمر.

• طريقة الحل الأصفر: اسم Yellowsolve هو مزيج من المصطلحين أصفر وسيلوسولف، حيث يتم وضع صبغة حمراء في حمض الأسيتيك المخفف، ثم يتم تجفيف العينة للتأكد من عدم وجود رطوبة، ثم يتم استبدال الصبغة الحمراء بصبغة صفراء في المذيب. ، مثل محلول خلية 2-إيثوكسي إيثانول.